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长冠苣苔属

长冠苣苔属

继续在培养箱中培养4h乳苣作用与功效

  下面结合具体实施例对本发明做详细具体的说明,但是本发明的保护范围并不局限于以下实施例。

  本发明的目的之一在于提供一种乳苣醇提物在制备抑制乳腺癌MCF-7细胞增殖的药物中的应用。

  风干的乳苣全草采于新疆博乐地区,常温保存。将100g乳苣粉碎,浸泡到400mL70%乙醇,置于冷凝回流装置微沸2小时,回收药液,重复两遍;将收集的药液过滤后进行旋转蒸发,得到的浓缩物置于烘箱烘干。用培养基溶解浓缩物,分别配置100.0μg/mL、80.0μg/mL、60.0μg/mL、40.0μg/mL、20.0μg/mL的终浓度。

  在上一步观察完毕后,向每孔中加入10μLMTT溶液(5mg/mL),继续在培养箱中培养4h,弃上清,每孔中加入150μL二甲基亚砜(DMSO),置摇床上低速振荡30min,使结晶物充分溶解。在酶联免疫检测仪上OD值为490nm处测量各孔的吸光值,计算IC50,发现乳苣醇提物对MCF-7细胞有强烈的抑制效果,细胞抑制率如图1所示,从图1中可以看出细胞状态与药物浓度呈正相关。

  第三步,用MTT法检测不同浓度乳苣醇提物对MCF-7细胞的抑制作用,发现乳苣醇提物对MCF-7细胞有明显的抑制效果。

  本发明通过用乳苣醇提物作用于乳腺癌MCF-7细胞和裸鼠MCF-7乳腺瘤模型,发现乳苣醇提物能明显抑制乳腺癌MCF-7细胞的生长和乳腺瘤的增殖,治疗期间小鼠体征体重无明显变化,说明无明显毒副作用。这表明乳苣有良好的抗癌功效,副作用小,可为预防、保健和治疗乳腺癌药物的研发以及临床应用提供良好基础。

  建立裸鼠乳腺瘤模型,灌胃给药15d,以750mg/kg、1500mg/kg、3000mg/kg的剂量给药,实验结果如图2所示,实验结果显示,与未给药对照组相比,实验组瘤的生长受到不同程度的抑制,平均瘤体积及瘤重明显小于对照组,且小鼠体重保持稳定,无明显副作用。

  乳腺癌,作为严重影响女性生存、生活的恶性肿瘤,被称之为女性的第一杀手,2018年2月,国家癌症中心发布了最新一期的全国癌症统计数据,其中,女性方面恶性肿瘤发病首位即为乳腺癌。据统计,发达国家和发展中国家女性乳腺癌发病率均排名第1,所以乳腺癌的相关研究和治疗药物的研发都是绝对的关注热点。乳腺癌,作为多基因参与、多步骤发生的恶性肿瘤,基因表达谱的不同使乳腺癌具有高度的异质性,因此多靶标治疗成为一种理想的治疗方式。而中草药作为多组分复合物具有与多靶标相互作用的功能,且对耐药性影响较小,可作用于肿瘤发生及发展中。近年来积累的实验数据和临床实验越来越支持中草药治疗肿瘤的优势,因此开发可预防、保健和治疗癌症的民族药成为迫切的问题。

  将乳腺癌MCF-7细胞置于96孔板中培养,至96孔板中的细胞单层铺满孔底时上药,分别为100.0μg/mL、80.0μg/mL、60.0μg/mL、40.0μg/mL、20.0μg/mL的终浓度处理细胞,孵育24小时,在倒置显微镜下对细胞进行观察,发现发现未给药组细胞状态良好,细胞透明;而实验组细胞则出现不同程度的细胞变小变圆、折光性差、悬浮细胞增加,死亡数较多,且细胞状态与药物浓度呈正相关。

  本发明的目的之二在于提供一种乳苣醇提物在制备抑制乳腺瘤生长的药物中的应用。

  在新疆有一种当地人称为天平草的民族药材,营养成分丰富,并具有很高的药用价值。它是新疆博乐市盐碱地带自然生长的野生草本植物,经鉴定其为乳苣,可以提高人体免疫力,治疗人体内的多种炎症,防治多种细菌或病毒引起的感染症,并对维持人体正常的生理活动有较好的作用,但具体机制尚未研究透彻。已有的对乳苣的研究主要集中在对乳苣的总黄酮和多酚的提取和抗氧化方面的研究。而关于乳苣醇提物在抗乳腺癌方面的研究,申请者尚未见国内外有报道。

 

点击次数:  更新时间:2020-09-16 20:51   【打印此页】  【关闭
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